Sujet : Rôles de la protéine Arpp19, un acteur central des divisions méiotiques. Sous la direction de Marika Miot (MCU SU) et Catherine Jessus (DR CNRS). Équipe biologie de l’ovocyte, Laboratoire de biologie du développement (LBD UMR7622), Institut de Biologie Paris Seine (IBPS), Sorbonne Université.

Equipe chaperons moléculaire et biogenèse des assemblages macromoléculaires (Philippe Meyer)Le complexe R2TP est un co-chaperon de Hsp90, il est constitué de 4 sous-unités qui sont RPAP3, Pih1D1, RuvBL1 et RuvBL2. Il est impliqué dans l’assemblage de complexes macromoléculaires tel que les snoRNP, l’ARN polymérase II ou encore les PIKK. La sous-unité RPAP3 possède deux domaines TPR, retrouvés chez de nombreux co-chaperons de Hsp70 et de Hsp90. Ces domaines permettent l’interaction co-chaperons / chaperons et sont donc essentiels à leurs fonctions régulatrices. Des études ont montré que la présence de l’isoforme n°2 de RPAP3 stimule l’activité ATPasique de Hsp90 et stabilise ce chaperon sous sa forme fermée. Néanmoins cette dernière ne semble pas interagir avec Pih1D1 et donc entrer dans la composition du complexe R2TP au contraire de l’isoforme n°1. Nous avons donc voulu déterminer quels était les effets de RPAP3iso n°1 sur Hsp90 mais également sur Hsp70. Pour cela, nous avons exprimé et purifié ces protéines, à partir desquelles nous avons réalisé différentes analyses fonctionnelles (activité ATPase). Nous avons ainsi déterminé que RPAP3 iso1 ne semble avoir aucun effet stimulateur sur Hsp90 ou Hsp70 contrairement à RPAP3iso2 . Ces deux isoformes ne diffèrent que de 34 acides aminés correspondant à la séquence ISO propre à l’isoforme 1. Ces résultats semblent indiquer une auto-inhibition de RPAP3 iso n°1. Celle-ci reposerait sur la présence de motif mimant les séquences reconnues par les domaines TPR. Ils pourraient former des interactions intramoléculaires avec les domaines TPR de RPAP3 et rendre ces domaines inaccessibles aux chaperons. Une structure récente du complexe R2TP suggère que cette auto-inhibition de RPAP3 pourrait être levée par la formation du complexe R2TP.

La Cytogaligine est une protéine codée par le gène humain GALIG (GAlectin-3 Internal Gene). Afin de déterminer les mécanismes cellulaires dans lesquels elle est impliquée, l’équipe cherche à mettre en évidence des interactions de la Cytogaligine avec des protéines dont les fonctions sont déjà connues. Dans cette optique, nous avons cherché, lors de mon stage, à déterminer si la Cytogaligine interagissait avec deux protéines : Hsc70 et TCTP. Hsc70 est une protéine chaperonne intervenant dans différents processus cellulaires, telles que la dissociation du manteau de clathrine ou encore dans l’autophagie au cours de laquelle cette dernière joue un rôle crucial, celui de convoyer les protéines aux lysosomes pour quelles y soient dégradées. Je me suis intéressé à étudier si la Cytogaligine interagissait préférentiellement avec l’un des deux domaines fonctionnels de cette chaperonne, le NBD (Nucleotide Binding Domain) en position N-Terminal et le SBD (Substrat Binding Domain) en position C-Terminal. Après construction des plasmides nécessaires à l’étude, les tests d’interactions, réalisés en utilisant la technique de Luciferase Protein Complementation Assay (LucPCA) ont révélé que la Cytogaligine interagit indifféremment avec ces deux domaines. De part cette interaction il est possible que la Cytogaligine puisse avoir un rôle régulateur de l’activité de Hsc70. La protéine TCTP intervient comme Hsc70 dans différents processus cellulaires. Elle possède une fonction antiapopototique s’opposant à celle pro-apoptotiques de la Cytogaligine. Nous avons donc voulu savoir si ces deux protéines interagissaient l’une avec l’autre. Les résultats obtenus à l’heure actuelle restent fragmentaires et ne permettent pas de conclure définitivement à une interaction ou une absence d’interaction entre la Cytogaligine et TCTP.

Implication de la protéine DSP1 dans la régulation de la voie JAK-STAT chez drosophila melanogaster. Sous la direction de Martine Decoville