Etude de la voie de signalisation CD95-CD95L dans le cancer épithéliale ovarien séreux de haut-grade et évaluation du rôle pronostique du CD95L

Stage de Master 2 de 6 mois subventionné par le LabEx-IGO (Laboratoire d'Excellence, Immunotherapy Graft Oncology) au sein de l'équipe 3 : "Réponses T anti-tumeurs et Immunothérapie" dirigée par le Dr. Nathalie Labarrière, au sein de l'unité médicale de recherche 892 de l'INSERM. Sujet de stage : Inactivation de l'expression de PD-1 sur des lymphocytes T CD8+ spécifiques de mélanome pour l'immunothérapie anti-tumorale.- Ficoll sur sang de patients HLA-A2 porteurs de mélanome- Préparation de Feeder Cells (Cellules nourricières irradiées favorisant la culture in vitro des lymphocytes T)- Stimulation antigénique et sélection des lymphocytes T CD8+ spécifiques d'antigènes de mélanome- Entretien quotidien des cultures cellulaires de lymphocytes T CD8+ spécifiques d'antigènes de mélanome- Cytométrie de Flux multiparamétrique : marquages intra- et extra-cellulaires (CD8, CD25, PD-1, IFN-gamma, TNF alpha)- Biologie Moléculaire (Production de plasmides CRISPR/CAS9-GFP en bactéries compétentes)- Biochimie (Digestions enzymatiques et Purification de plasmides par Electrophorèse en gel d'agarose)- Transfections d'ARN et de plasmides CRISPR/CAS9-GFP par électroporation et nucléofection des lymphocytes T CD8+ spécifiques d'antigènes de mélanome- Transductions virales (Adénovirus, AAV, VLPs, Lentivirus)- Clonages de lymphocytes T CD8+ PD-1neg par tri cellulaire au cytomètre de flux et entretien des clones en culture.- Génie Génétique : Technologie d'édition du Génome CRISPR/CAS9+ Participation à la gestion des stocks communs à l'équipe de recherche+ Présentations orales en réunion d'équipe+ Interactions avec l'ensemble des membres de l'équipe ainsi que du personnel des plateformes de Cytométrie, Irradiation, Production de vecteurs viraux et de l'Etablissement Français du Sang.

Stage de Master 1 de 3 mois subventionné par le LabEx-IGO (Laboratoire d'Excellence, Immunotherapy Graft Oncology) réalisé au sein de l'équipe 3 : "Réponses T anti-tumorales et Immunothérapies" dirigée par le Dr. Nathalie Labarrière, au sein de l'unité médicale de recherche 892 de l'INSERM.- Culture Cellulaire de lymphocytes T spécifiques d'antigènes de mélanome- Cytométrie de Flux (FACS CANTO et CALIBUR)- Biologie Moléculaire (PCR, Conversion Bisulfite)

Réalisation d'un stage volontaire d'observation (2 semaines), sur la période de vacances scolaire, au Centre de Recherche en Cancérologie Nantes-Angers sous la tutelle du Dr. Xavier Saulquin travaillant au sein de l'équipe 1 : "Immunobiology of Human Alpha Beta and Gamma Delta T cells & Immunotherapeutic Applications".- Découverte de l'environnement de travail propre à la Recherche Thérapeutique en Immunologie au sein d'un laboratoire de recherche publique affilié à l'Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM).- Extractions de lymphocytes T et B à partir d'organes lymphoïdes de souris.- Initiation à la cytométrie de flux avec des marquages de lignées B et T- Electrophorèses de protéines (Western Blot)- Réalisation de PCR