Samantha Schmitz Email and Phone Number

- Verantwoordelijk voor de planning door het plannen van release en stabiliteits samples, kwalificaties van nieuwe assays en Ad Hoc aanvragen.- Coordineren van de Release en Stability groep door prioriteiten te stellen, troubleshooting en het oplossen van problemen- Communicatie met aanvragers om ervoor te zorgen dat de data op tijd geleverd wordt- Samenwerking met verschillende afdelingen om de juiste resultaten te behalen- Schrijven van Quality Issues, Quality Investigations en Change Controls- Schrijven en reviewen van GMP documentatie- Bijhouden van KPI’s

Excecution of Analytical and Biochemical analyses within the department Quality Control Developement (QCD) several methods like pH, QPA, VP-QPCR, HPLC, TCID50, TGE-ELISA ans Osmolality.

Bij Sanquin heb ik mijn afstudeerstage gelopen. ''Het opzetten van een zuiveringsmethode voor recombinant FXII met nanobodies'' was de naam van mijn afstudeerproject. Het doel van dit project was het produceren en zuiveren van recombinant stollingsfactor XII en verschillende mutanten van factor XII (FXII), om de rol van FXI op FXII in de stolling beter in kaart te kunnen brengen. Tijdens deze stage zijn zuiveringsmethoden voor recombinant FXII waarbij gebruik werd gemaakt van anti-FXII nanobodies, vergeleken met een IgG antilichaam zuiveringsmethode. Er zijn in totaal FXII mutanten cellijnen en de FXII-WT cellijn geproduceerd. Van elke mutant zijn 3 cellijnen/kolonies opgegroeid en ingevroren. Deze zijn geselecteerd m.b.v. een FXII ELISA. Om het FXII uit de verschillende cellijnen te zuiveren zijn er anti-FXII nanobodies en anti-FXII OT2 gezuiverd uit E. coli en hybridoma kweekmedium respectievelijk en gekoppeld aan CNBr-activated Sepharose. De HEK cellen met het getransfecteerde FXII-WT zijn groots opgegroeid op een expressiemedium in een cellfactory. Wanneer er voldoende medium verkregen was, is dit gezuiverd op de anti-FXII nanobodies en de anti-FXII OT2 kolommen. Van het gezuiverde FXII is de zuiverheid gecontroleerd met een SDS PAGE gel.

Op de afdeling neuro-endocrinologie in het Erasmus Medisch Centrum heb ik mijn derdejaars stage gelopen.''Optimalisatie van een IGF-1 KIRA'' was de naam van mijn project tijdens deze stage. Naast het optimaliseren van een Insuline-achtige groeifactor (IGF) Kinase Receptor Activation (KIRA) bepaling heb ik ook gewerkt aan het opzetten van een Ready-to-Use KIRA. De KIRA-assay is gebaseerd op de binding van het IGF-1 aan een receptor. Wanneer IGF-1 aan een receptor bindt wordt deze receptor gefosforyleerd. Deze fosforylatie wordt gemeten met de KIRA-assay. Het gemeten signaal zegt iets over de hoeveelheid vrije IGF-1 of insuline dat in het bloed aanwezig is. Er is hierbij gewerkt met HEK293 en EBNA cellen die getransfecteerd zijn met het IGF-1 receptor gen. Hierdoor is de receptor in hoge hoeveelheid tot expressie gebracht en is het mogelijk om de fosforylatie te meten met de KIRA-assay. Voordat ik aan mijn project begon kon de KIRA-assay pas uitgevoerd worden wanneer de desbetreffende cellen die uit de stikstof komen, eerst enkele weken zijn opgekweekt. Dit is nodig, zodat de cellen zijn hersteld, gewend aan het kweekmilieu en de uitslagen vergelijkbaar zijn met eerdere proeven. Omdat dit tijdrovend is, heb ik een Ready-to-Use KIRA opgezet. Om een Ready-to-Use assay te kunnen gebruiken moeten de resultaten vergelijkbaar zijn met de resultaten van de KIRA-assay met cellen in kweek. Voor de Ready-to-Use assay zijn de cellen in grote hoeveelheden opgekweekt voordat ze in meerdere ampullen zijn ingevroren en vervolgens gebruikt zijn voor de KIRA-assay. Voor de Ready-to-Use assay was het de bedoeling om een grote hoeveelheid ampullen in te vriezen, die na ontdooien meteen uitgeplaat kunnen worden en geschikt zijn voor de KIRA-assay.